国产亚洲美女精品久久久2020,51精品视频在线一区二区,欧美午夜在线,v影院最新在线v视频,黄色视屏在线免费观看,97se亚洲国产综合自在线

咨詢電話

0571-56390366

當前位置:首頁  >  技術文章  >  核酸提取純化的方法有哪些?

核酸提取純化的方法有哪些?

更新時間:2024-03-11      點擊次數:567
核酸提取純化系統是一種用于從樣品中提取純凈核酸的儀器。可以快速、高效地提取純凈的核酸,并且通常具有自動化的功能,以減少實驗中的操作步驟和人工誤差。常見的純化方法包括酚氯仿法、鹽析法、玻璃珠法、硅膠膜離心柱法、磁珠法等。


1、苯酚氯仿法

苯酚氯仿提取DNA是利用酚是蛋白質的變性劑,反復抽提,使蛋白質變性,SDS(十二烷基磺酸鈉)將細胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白質或多肽或小肽分子,變性降解核蛋白,使DNA從核蛋白中游離出來。而DNA易溶于水,卻不溶于有機溶劑。蛋白質分子表面帶有親水基團,也容易進行水合作用,并在表面形成一層水化層,使蛋白質分子能順利地進入到水溶液中形成穩定的膠體溶液。當有機溶液存在時,蛋白質的這種膠體穩定性遭到破壞,變性沉淀。離心后有機溶劑在試管底層(有機相),DNA存在于上層水相中,蛋白質則沉淀于兩相之間。利用萃取原理,根據蛋白核酸溶于不同的試劑層,將槍頭伸入不同液層內抽取所需的成分,經多次洗滌后獲得純化核酸。

優點是采用了實驗室常見的試劑和藥品,做起來成本比較低廉。

缺點是由于使用了苯酚、氯仿等試劑,毒性較大,長時間操作對人員健康有較大影響,而且核酸的回收率較低,損失量較大,由于操作體系大,不同實驗人員操作重復性差,不利于保護RNA,很難進行微量化的操作。

2、鹽析法
在組織或者細胞裂解液中加入高濃度鹽(如碘化鈉)來沉淀蛋白質等雜質,從而得到DNA或者RNA。適用于對核酸純度要求較低的情況。
優點:成本低,操作簡單。
缺點:產物純度較低
 
3、玻璃珠法
在高鹽條件下,玻璃珠會自動吸附核酸,通過洗滌和離心去除掉蛋白質等雜質;在低鹽條件下,核酸可以從玻璃珠上洗脫下來,二次離心再通過沉淀干燥得到核酸。主要用于凝膠中回收核酸。
優點是成本低,操作方便。
缺點是玻璃珠殘留及不易干燥。
 

4、硅膠膜離心柱法
此種方法是利用核酸表面會覆蓋一層由水分子構成的薄膜,在高鹽環境下,這層親水膜會遭到破壞從而核酸可被吸附在離心柱上,而其他雜質如蛋白質、代謝產物等則會被離心沉淀與核酸分離。最后通過洗脫,將核酸從吸附膜上脫離,即可得到純化后的核酸。離心柱純化也是的試劑盒提取中廣泛的使用方法。
但即便如此,離心柱純化法仍存在缺點:高度依賴吸附膜的結合能力;洗脫不完全導致核酸流失;無法大量提取核酸

5、磁珠法核酸分離技術

攜帶正電荷的磁珠易于吸附負電荷的核酸,主要用于從人血清或血漿樣品中提取DNA 和RNA(例如從血液樣本中檢測HIV 或HBV 病毒基因組的樣品制備)。一般而言,將樣品與結合緩沖液和磁珠混合,核酸與磁珠結合后,經過數次洗滌與磁場捕獲,洗脫下來的核酸即可通過PCR 或其它特定方法來檢測特定的DNA或RNA。磁分離法也是廣泛應用于診斷行業,且能實現高通量、自動化的核酸提取方法。

 

掃碼關注

郵箱:support@bigfishgene.com

地址:浙江省杭州市富陽區銀湖街道富閑路9號銀湖創新中心6號樓

版權所有 ©2024 杭州比格飛序生物科技有限公司 All Rights Reserved    備案號:浙ICP備18015274號-3    sitemap.xml    管理登陸    技術支持:化工儀器網    
主站蜘蛛池模板: 激情开心站| 午夜精品久久久| 国产亚洲高清不卡在线观看| 97久久曰曰久久久| 色婷婷社区| 欧美激情五月| 久久这里只有精品免费看青草| 国产淫语| 国产精品久久久久久久免费大片| 激情九九| 亚洲永久精品一区二区三区| 色播五月激情| 欧美一级淫片| 免费在线观看亚洲| 久久久午夜视频| 精品一区二区免费视频 | 国产黄色免费| www.啪啪.com| 97综合网| 777第四色| 狠狠躁夜夜躁人人爽天天段| 亚洲国产精品久久婷婷| 视频二区在线观看| 日本国产高清色www视频在线 | 国产伦视频| 国产成人精品午夜| 成片免费观看视频在线网| 99爱色| 2021中文字幕在线观看| 久久综合精品不卡一区二区| 中国大陆一级毛片 免费| 五月天最新网址| 婷婷色九月综合激情丁香| 色青五月天| 四虎官网| 婷婷伊人网| 精品国产高清毛片| 九九在线观看免费视频| 伊人看片| 999精品视频这里只有精品| 97在线视频网站|